發(fā)布時(shí)間: 2020-07-03 點(diǎn)擊次數(shù): 1227次
簡(jiǎn)單的說(shuō),
PCR儀的PCR就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)大量合成。基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專(zhuān)一性的連鎖復(fù)制.目前常用的技術(shù),可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。
PCR的要素即基本的PCR須具備:
1.要被復(fù)制的DNA模板(Template);
2.界定復(fù)制范圍兩端的引物(Primers);
3.DNA聚合酶Taq(Polymearse);
4.合成的原料(四種脫氧核苷酸)及水。
熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)準(zhǔn)確、快速、重復(fù)性高,在食品安全領(lǐng)域發(fā)揮重要作用,目前已經(jīng)應(yīng)用于食源性致病病毒,食品過(guò)敏源,轉(zhuǎn)基因食品,乳品等檢測(cè),那具體是怎么樣實(shí)施的呢?
在食源性致病病毒檢測(cè)中,長(zhǎng)期以來(lái)采用細(xì)菌培養(yǎng)法。但是這種方法檢測(cè)周期長(zhǎng),靈敏度低,操作復(fù)雜,熒光定量PCR技術(shù)動(dòng)態(tài)范圍寬,靈敏度高,檢測(cè)速度快(40-60 min),已在副溶血性弧菌、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和和阪崎腸桿菌等食源性細(xì)菌檢測(cè)中越來(lái)越重要。熒光PCR儀對(duì)2084個(gè)感染性腹瀉標(biāo)本的檢測(cè),其中培養(yǎng)法陽(yáng)性檢出率為45.2%而熒光PCR為90.1%。再如出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SNT中規(guī)定對(duì)食品中致病菌檢測(cè)方法使用熒光PCR方法,SN/T中要求使用熒光PCR儀方法檢測(cè)奶粉中阪崎腸桿菌檢驗(yàn)方法。